1  目地,建立一个净化车间清洁区（室）沉降菌检验的限度操作流程，确保清洁区微生物检验按标准实行。, 2  局限性,企业全部清洁区（室）的沉降菌测量和自然环境的认证。, 3  责任人,品质技艺部对本SOP实行用心。, 4  程序流程,4.1  本检测方法接受地基沉降法，即根据当然地基沉降基本原理互联网在空气中的微生物颗粒于培养基平皿，经多个時间，在适宜的标准下让其滋长到由此可见的菌体举办记数，以平板电脑培养皿中的菌体数来分辨清理自然环境内的活微生物菌种数，并为此来鉴定清洁区（室）的 洁净度。,4.2  常用的仪器设备和武器装备,4.2.1  髙压灭菌设备,应用时要严苛凭据“髙压灭菌设备安全操作规程”和使用说明实际操作。,4.2.2  控温培养箱,务必按时对培养箱的温度表举办计量检定。,4.2.3  培养皿,接受Φ90mm×15mm的硼氯化镁夹层玻璃培养皿。,4.2.4  培养基,4.2.4.1  简单骨头汤琼脂培养基或别的中国药典认同的培养基。,4.2.4.2  培养基的提前准备及杀菌,4.2.4.2.1  将Φ90mm的培养皿放置121℃湿热灭菌20min或180℃干热灭菌1h。,4.2.4.2.2 将培养基加温融化，冷至45℃时，在无菌操作原则规定下将培养基引入培养皿，每皿约15ml。,4.2.4.2.3  等琼脂凝结后，将培养基平皿倒放置30℃-35℃控温培养箱中培养,48h，若培养基平皿上确实没有菌体生长发育，就可以供取样用。制取好的培养基平皿宜在2℃-8℃的自然环境中储放。,4.3  测试流程,4.3.1  取样方法,将已制取好的培养皿按5.4.1.2的规定置放，开启培养皿盖，使培养基外边外露0.5h，再将培养皿盖上之后颠倒。,4.3.2  培养,4.3.2.1  全部取样竣事后，将培养皿倒放置控温培养箱中培养。,4.3.2.2  在36℃±1培养箱中培养，時间不少于48h。,4.3.2.3  每次培养基应该有对比实验，磨炼培养基自身是不是环境污染。可每次选中3只培养皿作对比培养。,4.3.3  菌落计数,4.3.3.1  用人眼立即记数，标记或在菌落计数器上点计，随后用5-10倍高倍放大镜查验，有无忽略。,4.3.3.2  若培养皿上面有两个或两个之上的菌体重合，可辨别时仍以两个或两个之上菌落计数。,
, 5 重视事宜,5.1  检测用品要作杀菌处理，以保证 检测的稳定性、精确性。,5.2  接受一切对策避免人为因素对样版的环境污染。,5.3  对培养基、培养标准以及他主要参数作详尽的记录。,5.4  因为细菌种类多种多样，差别甚大，记数时一样平常用散射光于培养皿之后或正脸细心调查，不必漏计培养皿边沿生长发育的菌体，并须重视细菌菌落与培养基沉淀的差别，必须时要光学显微镜辨别。,5.5  取样前要认真仔细每一个培养皿的品质，如发觉霉变、损坏或环境污染的应去除。,
, 6  检测标准,6.1  测试状态,6.1.1  沉降菌检测前，被检测清洁区（室）的温度湿度须抵达划分的规定，负压差、 换风、气体压力务必操纵在划分值内。,6.1.2  沉降菌检测前，被检测清洁区（室）早已由消毒杀菌。,6.1.3  测试状态有静态数据和动态性二种，测试状态的挑选务必相符合生产制造的规定，并在叙述中标明测试状态。,6.2  检测员工,6.2.1  检测人同务必衣着相符合自然环境洁净度级其他事儿服。,6.2.2  静态数据检测时，房间内检测员工不可超过二人。,6.3  检测時间,6.3.1  对单边流，如100级净化处理屋子及层.流事儿台，检测应在空调净化系统软件一切正常运作不少于10min后最开始。,6.3.2  对非单边流，如10000级、100000级之上的净化处理屋子，检测应在空调净化系统软件一切正常运作不少于30min后最开始。,6.4  沉降菌记数,6.4.1  取样点数量以及布署,6.4.1.1  至少取样点数量,地基沉降法的至少取样等级可按表1明确。,
, ,
6.4.1.2  取样点的布署,6.4.1.2.1  事儿区取样点的部位距地0.8米~1.5m上下(稍高于事人情世故)。,6.4.1.2.2  可在重要武器装备或重要事儿流动性局限性处增加取样点。,6.4.1.2.3  取样点部位的详尽标准见图下。,6.5  记录,检测叙述中应记录屋子溫度、空气湿度、压力差及测试状态。,检测叙述的撰写见附注。,6.6  实际效果,6.6.1  用记数方法得到每个培养皿的菌体数。,6.6.2均值菌体数的筹算，见上式。, ,式中：M为均值菌体数,M1为2号培养皿菌体数,M2为2号培养皿菌体数,Mn为n号培养皿菌体数,n为培养皿数量。,
,6.7  实际效果鉴定,用均值菌体数分辨清洁区（室）空气中的微生物菌种。100,000级清洁区沉降菌(个／m2)应低于就是l0个；10000级清洁区沉降菌(个／m2)应低于就是3个；100级清洁区沉降菌(个／m2)应低于就是一个。,
,6.7.1  清洁区(室)内的均值菌体数务必小于所选中的鉴定限度。,
,6.7.2  若某清洁区（区）内的均值菌体数超越鉴定限度，则务必对于此事地区先举办消毒杀菌，随后再次取样2次，检测实际效果均须合格。,
, 沉降菌检测记录,   , , , , 1  目地,

净化车间沉降菌检测安全操作规程

1  目地

建立一个净化车间清洁区（室）沉降菌检验的限度操作流程，确保清洁区微生物检验按标准实行。

2  局限性

企业全部清洁区（室）的沉降菌测量和自然环境的认证。

3  责任人

品质技艺部对本SOP实行用心。

4  程序流程

4.1  本检测方法接受地基沉降法，即根据当然地基沉降基本原理互联网在空气中的微生物颗粒于培养基平皿，经多个時间，在适宜的标准下让其滋长到由此可见的菌体举办记数，以平板电脑培养皿中的菌体数来分辨清理自然环境内的活微生物菌种数，并为此来鉴定清洁区（室）的洁净度。

4.2  常用的仪器设备和武器装备

4.2.1  髙压灭菌设备

应用时要严苛凭据“髙压灭菌设备安全操作规程”和使用说明实际操作。

4.2.2  控温培养箱

务必按时对培养箱的温度表举办计量检定。

4.2.3  培养皿

接受Φ90mm×15mm的硼氯化镁夹层玻璃培养皿。

4.2.4  培养基

4.2.4.1  简单骨头汤琼脂培养基或别的中国药典认同的培养基。

4.2.4.2  培养基的提前准备及杀菌

4.2.4.2.1  将Φ90mm的培养皿放置121℃湿热灭菌20min或180℃干热灭菌1h。

4.2.4.2.2 将培养基加温融化，冷至45℃时，在无菌操作原则规定下将培养基引入培养皿，每皿约15ml。

4.2.4.2.3  等琼脂凝结后，将培养基平皿倒放置30℃-35℃控温培养箱中培养

48h，若培养基平皿上确实没有菌体生长发育，就可以供取样用。制取好的培养基平皿宜在2℃-8℃的自然环境中储放。

4.3  测试流程

4.3.1  取样方法

将已制取好的培养皿按5.4.1.2的规定置放，开启培养皿盖，使培养基外边外露0.5h，再将培养皿盖上之后颠倒。

4.3.2  培养

4.3.2.1  全部取样竣事后，将培养皿倒放置控温培养箱中培养。

4.3.2.2  在36℃±1培养箱中培养，時间不少于48h。

4.3.2.3  每次培养基应该有对比实验，磨炼培养基自身是不是环境污染。可每次选中3只培养皿作对比培养。

4.3.3  菌落计数

4.3.3.1  用人眼立即记数，标记或在菌落计数器上点计，随后用5-10倍高倍放大镜查验，有无忽略。

4.3.3.2  若培养皿上面有两个或两个之上的菌体重合，可辨别时仍以两个或两个之上菌落计数。

5 重视事宜

5.1  检测用品要作杀菌处理，以保证 检测的稳定性、精确性。

5.2  接受一切对策避免人为因素对样版的环境污染。

5.3  对培养基、培养标准以及他主要参数作详尽的记录。

5.4  因为细菌种类多种多样，差别甚大，记数时一样平常用散射光于培养皿之后或正脸细心调查，不必漏计培养皿边沿生长发育的菌落，并须重视细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必须时用光学显微镜判别。

5.5  取样前要认真仔细每一个培养皿的品质，如发觉霉变、损坏或环境污染的应去除。

6  检测标准

6.1  测试状态

6.1.1  沉降菌检测前，被检测清洁区（室）的温度湿度须抵达划分的规定，负压差、换风、气体压力务必操纵在划分值内。

6.1.2  沉降菌检测前，被检测清洁区（室）早已由消毒杀菌。

6.1.3  测试状态有静态数据和动态性二种，测试状态的挑选务必相符合生产制造的规定，并在叙述中标明测试状态。

6.2  检测员工

6.2.1  检测人同务必衣着相符合自然环境洁净度级其他事儿服。

6.2.2  静态数据检测时，房间内检测员工不可超过二人。

6.3  检测時间

6.3.1  对单边流，如100级净化处理屋子及层.流事儿台，检测应在空调净化系统软件一切正常运作不少于10min后最开始。

6.3.2  对非单边流，如10000级、100000级之上的净化处理屋子，检测应在空调净化系统软件一切正常运作不少于30min后最开始。

6.4  沉降菌记数

6.4.1  取样点数量以及布署

6.4.1.1  至少取样点数量

地基沉降法的至少取样等级可按表1明确。

6.4.1.2  取样点的布署

6.4.1.2.1  事儿区取样点的部位距地0.8米~1.5m上下(稍高于事人情世故)。

6.4.1.2.2  可在重要武器装备或重要事儿流动性局限性处增加取样点。

6.4.1.2.3  取样点部位的详尽标准见图下。

6.5  记录

检测叙述中应记录屋子溫度、空气湿度、压力差及测试状态。

检测叙述的撰写见附注。

6.6  实际效果

6.6.1  用记数方法得到每个培养皿的菌落数。

6.6.2均值菌落数的筹算，见上式。

式中：M为均值菌落数

M1为2号培养皿菌落数

M2为2号培养皿菌落数

Mn为n号培养皿菌落数

n为培养皿数量。

6.7  实际效果鉴定

用均值菌落数分辨清洁区（室）空气中的微生物菌种。100,000级清洁区沉降菌(个／m2)应低于就是l0个；10000级清洁区沉降菌(个／m2)应低于就是3个；100级清洁区沉降菌(个／m2)应低于就是一个。

6.7.1  清洁区(室)内的均值菌落数务必小于所选中的鉴定限度。

6.7.2  若某清洁区（区）内的均值菌落数超越鉴定限度，则务必对于此事地区先举办消毒杀菌，随后再次取样2次，检测实际效果均须合格。

沉降菌检测记录